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ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

產(chǎn)品名稱：胸苷酸合成酶ELIS檢測試劑盒
英文名稱：thymidylate synthetase
產(chǎn)品貨號：EY-E97483
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品保存：2-8℃，有效期6個月
主要組成成分：試劑 
    性狀：液體 
    產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T 
    96T指可以做94個標本，2個標準對照 
    48T指可以做47個標本，1個標準對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    待檢樣本：體液，血清，血漿，細胞培養(yǎng)上清液，尿液，組織勻漿,心房水標本等等。 

樣品收集、處理及保存方法
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項
1）試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

96孔PCR硅膠封板膜 10個/包  包

Estrone 雌酚酮 53-16-7  20mg

Weigert蘇木素染色液 2×500ml  瓶

Clobetasol propionate 丙酸倍他索 1g  瓶

Rifampicin 250mg  支

DM130大孔吸附樹脂 500g  瓶

Umbelliferone 7-羥基豆素 93-35-6  20mg

Gum tragacanth powder 黃蓍樹膠粉 100g  瓶

0.4%呂氏堿性美藍染色液 100ml  瓶

Urea 尿素 500g  瓶

PhosphoMycin disodiuM salt 鈉 5g  瓶

Magnesium chloride, hexahydrate 化鎂六水 100g  瓶

胸苷酸合成酶ELIS檢測試劑盒包含氧化還原酶的WW域抗原WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 0.5mg

X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) 0.5mg

XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原XAF1(XIAP-associated factor 1) 0.5ml

X射線修復(fù)交叉互補蛋白/細胞堿基切除修復(fù)基因抗原XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) 0.5mg

胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗原ZO-1 peptide 0.5mg

血管緊張素Ⅱ受體(抗原)Angiotensin II receptor(Ang II ) 0.5mg

ARC(多肽抗原)Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) 0.5mg

蛋白激酶C（多肽抗原）Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 0.5mg

腎上腺素能受體β1(抗原)Beta1-adrenergic receptor 0.5mg

膜粘連蛋白-5(抗原)Annexin V 0.5mg

水通道蛋白-4（抗原）AQP4(aquaporin Protein-4) 0.5mg